無菌室一般為4-5平方米、高2.5米的獨立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實驗室內(nèi),可以用板材和玻璃建造。無菌室外要設一個緩沖間,錯開門向,以免氣流帶進雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉、室內(nèi)裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置。在獲得了無菌環(huán)境和無菌材料后,只有保持無菌狀態(tài),才能對某種特定的已知微生物進行研究。所以控菌能力和控菌穩(wěn)定性是無菌室的核心驗收指標。業(yè)內(nèi)通行的驗收標準為100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000級潔凈室平均不得超過3個菌落,但由于持續(xù)穩(wěn)定性難以測試,所以國內(nèi)工程企業(yè)經(jīng)常出現(xiàn)3年翻新現(xiàn)象,導致性價比縮水;而國際品牌工程,由于普遍按歐美環(huán)境指標執(zhí)行,很難考慮國內(nèi)建筑材料適應性,所以也經(jīng)常發(fā)生穩(wěn)定性失常狀況。在通行標準之外,還設有自身執(zhí)行的長期維護、選材指標,凈化能力和環(huán)境適應力遠超國際品牌。
1、工作室應矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內(nèi)部裝修應平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌。
2、室內(nèi)采光面積大,從室外應能看到室內(nèi)情況。
3、為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設緩沖走廊,走廊旁再設緩沖間,其面積可小于無菌室。
4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜,其電源開關(guān)均應設在室外。
5、無菌室與緩沖間進出口應設拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應錯開,以免空氣對流造成污染。
1、無菌室應保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關(guān)的物品。
2、室內(nèi)檢驗用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動。
3、每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,最后紫外燈殺菌半小時。
4、定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,細菌數(shù)應控制在10個以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時,應立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(平板直徑均9厘米),置無菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時,然后倒置進行培養(yǎng),測細菌總數(shù)應置37℃溫箱培養(yǎng)48小時;測霉菌數(shù)則應置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細菌`霉菌總數(shù)均不得超過10個為。
5、無菌室殺菌前,應將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈殺菌30分鐘,時間一到,關(guān)閉紫外燈待用。
6、進入無菌室前,必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
7、操作應嚴格按照無菌操作規(guī)定進行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理,不同的對象采用不同的處理方法:
1、高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內(nèi),一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應分別處理。
2、火焰滅菌:接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。
3、高溫干燥滅菌:各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時。
4、一般消毒:無菌室內(nèi)的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌,必須用其他方法進行消毒處理,采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進行消毒。
5、空氣的消毒:開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。